实验动物科学 ›› 2022, Vol. 39 ›› Issue (6): 74-80.DOI: 10. 3969 / j. issn. 1006-6179. 2022. 06. 013
摘要: 目的 探讨海立啮齿杆菌( Rh) 外膜蛋白 A( OmpA) 原核表达蛋白对小鼠的免疫效果。 方法 采用原核表达、镍离子亲和层析纯化,制备 Rh OmpA 重组蛋白,并用 SDS-PAGE 和 Western blot 进行鉴定。 获得的 OmpA 目的蛋白经腹腔、肌肉联合注射和滴鼻两种方案免疫ICR小鼠, 由 ELISA方法测定其抗体滴度。再分别将 RhATCC12555、嗜肺啮齿杆菌(Rp)ATCC35149 和 Rh 分离株 PP320 对免疫小鼠腹腔接种攻毒,评价重组蛋白 OmpA对小鼠的保护效果。 结果 以表达蛋白 OmpA 为包被抗原的 ELISA 方法检测免疫小鼠血清中OmpA 特异性抗体水平,平均抗体滴度为 19. 84log2。 免疫小鼠对两标准菌株和 PP320 的保护率分别为 60%、60%和 80%,与未免疫小鼠相比死亡率显著降低(P<0. 001) 。 基于 OmpA 表达蛋白建立的 ELISA 方法检测嗜肺巴斯德杆菌( Pp) 阳性小鼠血清,抗体阳性率为 60%。 结论 制备的 Rh OmpA 表达蛋白有良好的免疫原性,对 Rh 和 Rp 具有一定的保护效果,为实验动物中呼吸道病原菌的防控提供参考。
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